Як визначати групи крові за допомогою цоліклонов?

Цоліклон – це сольовий розчин моноклональних антитіл до антигенів еритроцитів людини.

Моноклональні антитіла використовують для визначення групи крові. Для їх одержання застосовують гібридомної технології.

Цоліклони анти-А і анти-В призначені для визначення груп крові людини системи АВО взамін стандартних ізогем-аглютинативна сироваток.

Цоліклони анти-А і анти-В є продуктом гібридомних клітинних ліній, отриманих в результаті злиття мишачих антітелообразующіх В-лімфоцитів з клітинами мишачої мієломи (пухлина кісткового мозку). Індивідуальні гібридомної лінії продукують гомогенні антитіла тільки одного класу імуноглобулінів, які повністю ідентичні за структурою і біологічною активністю. Антитіла, які продукують клітинами одного клону (потомство однієї клітини), є моноклональними.

Довідка про клональних антитіла:

Культура клітин однієї специфічності, що походять з одного лімфоцита, утворює клітини одного клону. Головне полягає в наступному: необхідно отримати від однієї клітини специфічні антитіла і напрацювати їх у необмеженій кількості. Складність полягає в подоланні двох завдань: по-перше, нормальні клітини після кількох поділів гинуть по-друге, тільки ракові клітини здатні необмежено розмножуватися. Для вирішення цих двох несумісних проблем в 1975 році Г. Келер і К. Мільштейн створили клітинні гібриди, або гібридоми. Гібридоми – це злиття нормальних лімфоцитів у живильному середовищі з клітинами мієломи. Лімфоцити в цьому середовищі не гинуть, а від мієломна партнера отримують можливість нескінченно розмножуватися. Таким чином, гібридомної клан розмножується, а в результаті цього процесу утворюються моноклональні антитіла.
Лімфоцити, що несуть агтлютіноген А, виробляють специфічне антитіло анти-А; лімфоцити, що несуть агтлютіноген В, виробляють специфічне антитіло анти-В.

Моноклональні анти-А і анти-В антитіла продукуються двома різними гібридоми. Цоліклони анти-А і анти-В являють собою розведену асцитної рідина мишей-носіїв відповідної гібридоми, в якій містяться специфічні імуноглобуліни класу М (IgM), спрямовані проти группоспеціфіческіх антигенів А чи В людини.
Таким чином, цоліклони не містять антитіл іншої специфічності і тому не викликають неспецифічної поліагглютінаціі еритроцитів.

Авідність, тобто час настання реакції аглютинації і її вираженість, у цоліклонов анти-А і анти-В вище, ніж у ізогемагглютінірующіх АВО-сироваток, особливо у випадку слабко виражених антигенів еритроцитів.

Цоліклони використовують у вигляді порошку червоного (анти-А) або синього (анти-В) кольору, порошок розводять ізотонічним розчином натрію хлориду безпосередньо перед дослідженням.

Методика визначення групи крові за допомогою цоліклонов анти-А і анти-В:

Цоліклони анти-А і анти-В наносять на білий планшет по одній великій краплі (0,1 мл) під відповідними написами: анти-А і анти-В. Поруч з ними наносять по одній маленькій краплі (0,01 мл) досліджуваної крові. перемішування складових частин виробляють скляною паличкою або кутом предметного скла, які промивають і насухо витирають перед розмішуванням кожної краплі. Спостереження за реакцією проводять при легкому погойдуванні протягом не більше 2,5 хвилини. Позитивний результат при визначенні групи крові виявляє себе аглютинацію (склеювання) еритроцитів. При цьому агглютіната можна побачити без будь-яких пристосувань у вигляді дрібних червоних агрегатів, швидко зливаються і утворюють великі пластівці.
При негативній реакції визначення групи крові крапля залишається рівномірно забарвленою в червоний колір, агтлютінати в ній не виявляються. Аглютинація, зазвичай, визначається в перебігу перших 3-5 секунд. Незважаючи на це, спостереження за результатами необхідно вести не менше 2,5 хвилини через можливість більш пізнього настання аглютинації з еритроцитами, що містять слабкі різновиди антигенів А чи В.

Джерела:

  • meduniver.com-веб-сайт, присвячений медицині
  • Загальна хірургія: навчальний посібник / С. В. Петров. 3-е изд., Перераб. і доп. – М.: Геостар-Медіа, 2006
  • Вікіпедія

Category: Медицина і здоров'я

Comments (Прокоментуй!)

There are no comments yet. Why not be the first to speak your mind.

Leave a Reply